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柱前衍生法分析小分子肽样品中氨基酸含量
2021-11-10 11:45

       小分子肽是介于氨基酸与蛋白质之间一种生化物质,它比蛋白质分子量小,又比氨基酸分子量大,是一个蛋白质的片段。在人体内起重要的生理作用,大家都知道,控制疾病的源头就是保证细胞的营养充足,而小分子肽是人体最易被细胞吸收利用的化合物之一。依利特使用EClassical 3200液相色谱仪匹配经典的Elite AAK氨基酸分析专用色谱柱,对样品中的含量进行分析检测。


实验方法

样品预处理方法:

样品溶液配制:分别称取大豆肽、玉米低聚肽、II型胶原蛋白肽加水5ml溶解,分别放入50ml 离心管中,加乙腈25ml作为沉淀剂,摇匀。离心机 10000r/min、15分钟。取上清液20ml至50ml容量瓶中,加缓冲液定容(衍生缓冲液固体组分B 4.1g,加水约950ml,用冰醋酸调PH至6.4-6.8,加10mlN,N-二甲基甲酰胺,加水定容至 1000ml)。从中取10ml至50ml试剂瓶中,加5ml 衍生化溶液,用封口膜封口,暗处60°C水浴 60min,放冷至室温,用缓冲液定容。过滤后进样10ul。


色谱条件及配置



实验结果

18种氨基酸混合溶液图谱:


样品成分表:



大豆肽溶液图谱:

大豆肽成分表:

玉米低聚肽溶液图谱:

玉米低聚肽成分表:


II型胶原蛋白肽溶液图谱:

II型胶原蛋白肽成分表:

从上图及结果可知,大豆肽游离氨基酸总量每克中含3.16mg、玉米低聚肽游离氨基酸总量每克中含 2.19mg、II型胶原蛋白肽游离氨基酸总量每克中含 0.22mg。Elite AAK氨基酸分析专用色谱柱,搭配依利特最新款的EClassical 3200液相色谱仪,满足定量分析的需求。


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