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色谱柱的安装与使用
2022-07-11 15:16
  色谱柱的固定相是以超纯全多孔球形硅胶为基质,通过采用固定相键合技术,使用含有氨基丙基官能团的有机硅烷键合而成,能比硅胶柱更快达到平衡,对流动相的水含量没有硅胶柱敏感。
  安装:
  1、拆开柱包装盒,确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。
  2、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。
  3、按柱管上标示的流动相流向,将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接(如条件允许,建议在柱前使用保护柱);柱的出口与检测器连接。连接管是外径为1.57mm、内径为0.1-0.3mm的不锈钢管。在接管时一定要设法降低柱外死体积。连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底,然后顺时针拧紧空心螺钉,直到拧不动为止,切记不要用力过大。如色谱柱通过流动相加压后有漏液现象,请用扳手继续顺时针拧1/4圈,直至不漏液为止。
  使用:
  色谱柱在使用前,进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照出厂报告中的条件进行,只有这样,测得的结果才有可比性。
  注意事项:
  1、正相条件正相使用时,不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于还原糖的分析。
  2、反相条件pH值越低越有发生水解的危险,所以要严格控制pH范围,使其pH范围在2.0~8.0,通常建议使用范围pH3.0~7.0比较合适。
  3、流动相中水相比例越高越有发生水解的危险,所以应尽量减少水在氨基柱上的保留,建议水相使用比例。
  4、短时间内,氨基柱可保存在纯甲醇,乙腈或异丙醇中,若长时间不使用建议保存在异丙醇和正己烷试剂中封存。
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