液相色谱柱是液相色谱分析系统的核心部件，实验结果准不准，很多时候就看它用得对、护得好与否。做好正确使用和日常维护，才能让每一次分析数据都靠谱。

一、色谱柱使用说明

使用前注意

新色谱柱里的储存液，一般是出厂评价报告上指定的流动相。用之前先确认一下这储存液和你要用到的样品流动相能不能混溶，别直接混用出问题。要是反相色谱里，你用的洗脱剂是高浓度盐或者缓冲液，记得先换成10%低浓度有机相洗脱剂过渡下，这样能避免盐析堵了柱子。

流动相要求

配制流动相建议用色谱纯的有机溶剂和超纯水，要是流动相里含盐，应该过一下0.45 μm的滤膜。流动相的容器和在线过滤器也得定期清洗，别让颗粒杂质堆积。常规的硅胶基质键合相填料，适合在pH 2.0-8.0的环境中使用；要是分析碱性化合物，选BDS C18填料更合适，它能耐受pH 2.0-10.0的范围。不过，要是在pH临界值附近用了柱子，用完尽快用合适的溶剂清洗干净。

样品处理

样品得提前预处理，比如用样品过滤器或者预处理柱（SPE）处理。遇到难处理的样品，加个保护柱能减少很多麻烦。另外，做正相色谱分析时，所有溶剂和样品都得严格脱水，不然会影响分析结果。

表 1：色谱柱使用关键要点

二、色谱柱保存方法

日常保养

每次用了缓冲液或者含盐的流动相后，先拿 10% 甲醇 / 水冲洗柱子 30 分钟，把盐分冲掉，之后再用纯甲醇冲洗 30 分钟。这里要注意，别用纯水直接冲，容易引起填料塌陷，反而损坏柱子。

长期保存

不同类型的柱子，保存方式不一样：反相柱要泡在纯甲醇或者乙腈里；正相柱得放在脱水的纯正己烷中；离子交换柱则保存于含叠氮化钠的水溶液里。保存时记得把柱子原装的堵头堵好，放在室温环境下就行。

表 2：色谱柱保存规范

三、色谱柱再生处理

反相柱再生

按顺序用20-30倍柱体积的溶剂冲洗：先用甲醇/水（10/90，V/V）溶液冲洗，再用乙腈冲，然后用异丙醇冲；完成后，反顺序按异丙醇、乙腈、甲醇/水溶液的再冲一遍。

正相柱再生

同样用20-30倍柱体积的溶剂依次冲洗：先正己烷，再异丙醇、二氯甲烷，后甲醇；随后反过来按甲醇、二氯甲烷、异丙醇、正己烷的顺序再冲。特别提醒，所有用到的溶剂都必须严格脱水，一点水分都不能有。

表 3：色谱柱再生流程

四、常见问题与解决方案

柱压异常升高

遇到柱压莫名升高，大概率是这几个原因，对应处理就行：

筛板堵塞：要么反冲色谱柱，要么把柱头拆下来超声清洗 —— 用 10% 稀硝酸超声 10 分钟，之后再用纯水超声 10 分钟。

填料污染：把柱头前端被污染的填料换掉就行。

盐结晶：先用 10% 甲醇 / 水冲洗，把结晶溶解掉，之后再换高浓度甲醇继续冲。

pH 不合适：要是因为pH不合适导致固定相结构受损，这种情况通常很难恢复，只能平时多注意色谱柱的pH适用范围。

表 4：柱压异常升高问题处理

其实只要用对方法、做好维护，不仅能延长色谱柱的使用寿命，更能让每一次分析结果都稳定准确，少走不少实验弯路。