在药品检验、环境监测、食品分析等关键领域，高效液相色谱仪（HPLC）的检测数据直接决定实验结论的可靠性。而校验作为保障仪器性能稳定的核心环节，是实验室质量管理体系中的一环。无论是新购仪器的验收，还是日常使用中的性能确认，掌握科学的校验方法都至关重要。本文结合国标要求与行业实践，详细拆解HPLC校验的标准、核心方法及合理周期，助力实验室合规运营。

先搞懂：HPLC校验的两大核心场景

HPLC的校验并非“一刀切”，需根据仪器使用阶段区分场景，不同场景的校验重点差异显著：

- 首次校验/验收校验：新仪器安装调试后，或仪器经过大修、核心部件更换后，必须进行全面的性能验证，确认仪器符合使用要求后方可投入使用。

- 定期校验/期间核查：仪器正常使用过程中，为持续监控其性能稳定性，避免因仪器漂移导致检测误差，需按固定周期进行的常规性能确认，是实验室日常质量控制的关键动作。

一、HPLC校验必须遵循的权威标准

校验工作的核心是“有标可依”，国内外针对HPLC的校验已形成完善的标准体系，实验室需结合自身领域（如制药、食品、环境）选择对应的标准，确保校验合规性。

1. 中国法定强制标准：JJG 705-2014

由国家计量检定规程规定的《液相色谱仪检定规程》（JJG 705-2014），是国内HPLC校验的“根本遵循”，具有法律效力。该标准明确规定了HPLC各部件的检定项目、技术指标、环境条件及具体检测方法，适用于各类液相色谱仪的法定检定，实验室必须严格执行。

2. 国际通用行业指南：制药领域重点参考

在制药、医药研发等对数据要求极高的领域，国际标准是校验工作的重要补充，其中常用的包括：

- USP <1058> 分析仪器确认：美国药典提出的仪器确认体系（DQ设计确认、IQ安装确认、OQ运行确认、PQ性能确认），是全球制药行业仪器校验的通用框架，明确了从仪器采购到日常使用的全流程校验要求。

- ICH Q2(R1) 分析方法验证：国际人用药品注册技术协调会发布的指南，虽聚焦分析方法验证，但明确要求仪器性能必须满足方法验证的指标，是校验结果的重要评判依据。

- GMP药品生产质量管理规范：国内及国际GMP均强制要求，用于药品放行、中间产品检测的HPLC必须经过严格的确认和定期校验，且校验记录需完整归档。

3. 实验室内部SOP：个性化补充

多数规范实验室会结合国标、国际指南及仪器厂商的操作说明，制定内部的《HPLC校验标准操作规程》，对校验细节进行细化，部分指标甚至会严于外部标准，以满足特定检测需求。

二、实操干货：HPLC核心校验项目与方法

HPLC校验的本质是通过标准物质和规范流程，测试仪器关键性能指标是否达标。常用的标准物质包括萘、尿嘧啶、氧化钬滤光片、药典对照品等，需在符合要求的环境（温度15-30℃，湿度40%-75%，无振动、电磁干扰）下进行测试。以下是6大核心校验项目的详细操作方法及验收标准：

标准校验流程5步法

校验工作需严格遵循“准备-执行-计算-判断-归档”的闭环流程，确保每一步可追溯：

1. 前期准备：按SOP配制流动相（需过滤脱气）、标准品溶液，安装适配的色谱柱（如C18柱），开机平衡系统至压力、基线稳定。

2. 项目执行：按上述项目逐一测试，实时记录原始数据（包括流速、压力、温度、峰面积、保留时间等关键信息），不可事后补记。

3. 数据处理：用Excel或专业软件计算RSD、偏差、线性回归方程等参数，确保计算过程无误。

4. 结果判断：将计算值与标准对比，全部达标则判定“校验合格”；任一指标超标需停机排查原因（如更换色谱柱、校准检测器）后重新校验。

5. 报告归档：生成包含仪器信息、校验人员、原始数据、结论的校验报告，与标准品证书、SOP一同归档，保存期至少符合行业法规要求（如制药行业至少5年）。

三、合理设定校验周期：既合规又高效

校验周期并非固定不变，需结合“法规要求+仪器使用情况+风险等级”综合设定，避免过度校验增加成本或校验不足导致风险。

1. 法定强制检定：2年一次，不可逾期

根据JJG 705-2014的强制要求，HPLC的法定检定周期为2年。但出现以下情况需提前检定：仪器搬运至新场地、更换泵头/检测器等核心部件、检测结果出现异常且怀疑仪器问题时。未按规定完成检定的仪器，不得用于出具法定检测报告。

2. 定期校验与期间核查：分级管理

除法定检定外，实验室需建立“全面校验+期间核查”的常态化机制，具体周期可参考：

- 年度全面校验：每年进行1次完整的OQ/PQ确认，覆盖上述所有核心校验项目，相当于对仪器性能进行“全面体检”。

- 季度/半年期间核查：简化版校验，重点测试系统整体性能（柱效、保留时间重复性、进样精度），快速确认仪器是否处于受控状态，适合日常监控。

- 每日/每周系统适用性测试：每次正式检测前，进样标准品确认基线、峰形、保留时间正常，虽非严格意义上的“校验”，但能及时发现当日仪器异常，是实验室的必备操作。

3. 特殊场景：缩短周期，强化管控

对于用于药品放行检测、食品安全仲裁、司法鉴定等关键场景的HPLC，需适当缩短校验周期，建议“每半年全面校验+每月期间核查”；若仪器使用频率极高（如每天运行8小时以上），也应相应缩短周期，避免性能衰减导致风险。

四、实验室校验管理核心建议

1. 建立“一机一档”：为每台HPLC建立专属档案，记录仪器型号、采购时间、历次校验报告、维修记录等信息，实现全生命周期管理。

2. 明确责任分工：指定专人负责HPLC的日常维护与校验工作，校验人员需经过专业培训，具备相应资质（如计量检定员证书）。

3. 动态调整周期：若期间核查中多次出现指标接近临界值，或仪器频繁出现故障，需立即缩短全面校验周期，并排查根本原因。

4. 重视异常处理：校验不合格的仪器需张贴“暂停使用”标识，维修后重新校验合格方可恢复使用，严禁“带病运行”。

HPLC校验是实验室数据可靠性的“压舱石”，需结合法定标准与实际需求，建立科学、规范的校验体系。只有将校验工作落到实处，才能确保仪器始终处于佳性能状态，为各类检测工作提供精准、可靠的数据支撑。

HPLC校验常见问题解答

问题1：HPLC的法定检定和实验室定期校验有什么区别？

两者核心区别体现在性质、依据和周期上：法定检定是具有法律效力的强制要求，必须依据JJG 705-2014执行，周期固定为2年，由具备资质的计量机构完成，结果直接关系仪器能否用于出具法定报告；实验室定期校验是内部质量控制手段，可结合USP <1058>、GMP等标准及自身需求制定方案，包括年度全面校验和季度/半年期间核查，目的是持续监控仪器日常性能，周期可动态调整。

问题2：校验时发现紫外检测器波长偏差超标，该怎么处理？

首先应暂停仪器使用并张贴“暂停使用”标识，避免误用导致数据错误；其次排查常见原因，如检测器光路污染、滤光片偏移等，可按仪器SOP进行光路清洁、重新校准滤光片位置；若自行排查无效，需联系仪器厂商售后进行专业维修，更换故障部件（如波长校正组件）；维修完成后，需重新对紫外检测器进行波长准确度校验，确认偏差≤±2 nm后方可恢复使用，整个过程需详细记录在仪器档案中。

问题3：用于药品放行的HPLC，校验周期可以和普通检测用仪器一样吗？

不建议采用相同周期。药品放行检测直接关联药品质量与用药安全，属于高风险场景，对仪器性能稳定性要求更高。普通检测用HPLC可遵循“2年法定检定+1年全面校验+季度期间核查”的常规模式；而药品放行用HPLC需强化管控，建议缩短周期，如“2年法定检定+半年全面校验+每月期间核查”，同时在每次检测前必须进行系统适用性测试，确保仪器当日性能符合检测要求，若期间核查出现指标波动，需进一步缩短校验间隔。