液相色谱仪

2021199_食品_UV254nm_Supersil SiO2 5μm __维生素D、D2对照品

作者：依利特2025-08-26

2020012_化药_UV325nm_Supersil SiO2 5µm_维生素A制剂_维生素A醋酸酯

作者：依利特2025-08-26

2020073_化药_UV265nm_Hypersil SiO2 5µm_维生素D3样品_

作者：依利特2025-08-26

2017152_化药_UV360nm_Hypersil ODS2 5µm_注射用水溶性维生素_维生素B12

作者：依利特2025-08-15

通过UHPLC-MS/MS分析婴儿配方奶粉中的水溶性维生素

作者：admin2025-09-05

简介​水溶性维生素 (WSV) 主要由复合维生素 B 组成，是许多食品，尤其婴儿配方奶粉的基本成分。这些维生素在代谢途径中发挥着关键作用，日常饮食摄入可以产生显著健康获益。​由于美国食品药品监督管理局 (FDA) 制定了这些维生素的每日营养推荐值，因此食品和补充剂生产商以及独立检测实验室需要能够定量鉴定该类产品中的维生素含量。在进行强化食品分析时，由于维生素浓度范围较广，与每日容许摄取量保持一致尤其具有挑战性 (见表 1)。例如，在婴儿牛奶中，维生素 B12 (氰钴维生素) 的浓度为 1-2ppb，而维生素 B2 (核黄素) 的浓度则高达 1000 倍 (1-2 pm)。因此，任何定量分析方法都必须能够适应这种广泛的浓度分布。我们提出了一种 LC-MS/MS 方法，一次进样即可定量分析 B 族维生素。分析的维生素包括维生素 B1 (硫胺素)、B2 (核黄素)、B3 (烟酸)、B3*(烟酰胺)、B6 (吡哆醇)、B7 (生物素)、B9 (叶酸) 和维生素 B12 (氰钴胺)，使用三个内标。采用简单的液液萃取法从婴儿配方奶粉中提取维生素。样品提取与快速分析方法 (<6 分钟) 相结合具有稳定性 / 可靠性，并且耗时最少。​实验​硬件 / 软件​液相色谱串联质谱分离使用 EClassical3200L-MS2Vertical 9100 液相质谱联用系统，所有仪器控制、分析和数据处理均使用液质软件平台执行。​方法参数​LC 和 MS/MS 方法参数分别见表 2 和表 3。溶剂、标准品和样品制备​使用的所有溶剂、试剂和稀释剂均为 HPLC 级，并通过 0.22-um 尼龙针头式过滤器过滤。​对于所有样品的稀释，使用 5-mM 甲酸铵，并用 10% 甲酸调整 pH 为 4.9。​所有 B 族维生素标准品，包括 B1 (硫胺素)、B2 (核黄素)、B3 (烟酸)、B3*(烟酰胺)、B6 (吡哆醇)、B7 (生物素)、B9 (叶酸) 和 B12 (氰钴胺) 均从 Sigma-Aldrich Inc.,Saint-Louis,MO. 购买。​为了校准和定量，使用了三个内标：维生素 B1"(硫胺素；​13C4​C8​H17​ N4​OS+)、B7"(生物素；​C10​D2​H14​ N2​O3​ S) 和 B2'(核黄素；​13C4​C13​H2015​ N2​ N2​O6​))，全部来自 Sigma-Aldrich Inc.。校准 B3、B3*、B6 和 B1 时采用 B1'，校准 B7、B9 和 B12 时采用 B7，校准 B2 时采用 B2。​分析样品包括两种商购获得的婴儿配方奶粉，标记为 IF1 和 IF2。​表 3.MS/MS 参数为了防止可能的标准品或样品不稳定性，所有储备和工作标准品均冷藏存储，直到使用；所有制备样品均在 4 小时内进行分析，并且只使用琥珀色 2mL LC 小瓶。​所有标准品和样品均通过 0.22-um 尼龙过滤器过滤。​实验​标准品制备​在 250mL 容量瓶中制备 40ug/mL 的 B2、B9 和 B7 储备标准品。由于这三种维生素在碱性条件下溶解最佳，所以首先在烧瓶中加入 50mL0.05% 氢氧化

反相UHPLC-MS/MS分析保健食品中的脂溶性维生素

作者：admin2025-09-15

简介维生素是人体内各种代谢功能所必需的微量营养素。维生素可分为水溶性和脂溶性维生素。脂溶性维生素 (FSV) 主要由维生素 A、D、E 和 K 组成，储存在肝脏和脂肪组织中，消除速率比水溶性维生素慢。因此，人体不需要经常补充 FSV。FDA 建议人体 FSV 推荐摄入量 / 耐受量见表 1。由于脂溶性维生素的溶解度有限，食品、食品添加剂和补充剂中的 FSV 一般主要采用正相液相色谱法进行分析，在样品制备和后续色谱分析中通常使用二氯甲烷作为主要有机溶剂。但是由于与所用溶剂有关的固有危害，以及较高处置成本，这种方法可能并不理想。当使用反相液相色谱法 (RPLC) 时，将脂溶性维生素溶解到适当溶剂中是一项挑战。还必须考虑到任何额外的样品步骤将增加分析时间。此外，通过 RPLC 分析脂溶性维生素时，由于二氯甲烷常被用作样品稀释剂，所以避免因溶剂效应而导致的早期洗脱物出现色谱峰变形是一项重大挑战。基于上述考虑，本文提出了分析物在 100% 二氯甲烷中溶解 / 稀释并通过反相 UHPLC-MS/MS 分析 FSV 的一种方法。实验溶剂和标准品使用的所有溶剂、试剂和稀释剂均为 HPLC 级或更高。所有稀释均使用 HPLC 级二氯甲烷。FSV 标准品，包括维生素 A 醋酸酯 (视黄醇醋酸酯)、D3 (胆钙化醇)、D2 (麦角钙化醇)、K2 (甲基萘醌)、E (生育酚)、E 醋酸酯 (生育酚醋酸酯)、K1 (叶洛醌) 和 A 棕榈酸酯 (视黄醇棕榈酸酯)，均从密苏里州圣路易 Sigma-Aldrich Inc. 获得。使用二氯甲烷制备 100μg/mL FSV 工作标准品。为了防止标准品不稳定，所有储备和工作标准品均冷藏 (4°C) 存储，并且只使用 2mL 琥珀色 LC 小瓶。硬件 / 软件色谱分离使用依利特科技 UHPLC 系统及依利特科技 MS2 Vertical 9100 液相质谱联用系统检测器。所有仪器控制、分析和数据处理均使用软件平台进行。方法参数LC 和 MS/MS 方法参数分别见表 2、表 3、表 4。结果和讨论如图 1 所示，在不到 15 分钟的时间内实现了 8 种维生素良好色谱分离，如图 2 所示，5 次重复检测的重叠显示了出色的色谱重现性。三组 10 次重复进样使用二氯甲烷制备的 100μg/mL FSV 标准品，所有峰面积的 % RSD 均小于 3%(表 5)。这表明进样之间拥有出色的重现性。结论通过减少 LC 进样量和提高所使用色谱柱的内径，反相色谱法可直接应用于二氯甲烷中制备的脂溶性维生素分析，并且不会因溶剂效应导致的早期洗脱分析物色谱峰失真而造成色谱性能损失。获得的面积 % RSD<3%，表明方法重现性出色。结果表明，该方法适用于脂溶性维生素的反相 UHPLC-MS/MS 分析。参考U.S. Food and Drug Administration (FDA), Guidance for Industry: A Food Labeling Guide (14. Appendix F

食品行业维生素检测 解决方案

作者：admin2025-09-23

目录第 1 章 前言 11.1 HPLC 法测定维生素含量的标准 11.2 仪器配置简表 2第 2 章 维生素 A 的含量测定 32.1 反相高效液相色谱法 32.2 正相高效液相色谱法 102.3 紫外分光光度计法 11第 3 章 维生素 D 的含量测定 133.1 反相高效液相色谱法 133.2 正相高效液相色谱法 19第 4 章 维生素 E 的含量测定 214.1 反相高效液相色谱法 214.2 正相高效液相色谱法 26第 5 章 维生素 B1 的测定 295.1 仪器设备与试剂 295.2 实验方法 305.3 实验结果 31第 6 章 维生素 B2 的测定 346.1 仪器设备与试剂 346.2 实验方法 356.3 实验结果 36第 7 章 维生素 B3 (烟酸) 的测定 397.1 仪器设备与试剂 397.2 实验方法 407.3 实验结果 41第 8 章 泛酸的测定 448.1 仪器设备与试剂 448.2 实验方法 458.3 实验结果 46第 9 章 维生素 B6 测定 499.1 仪器设备与试剂 499.2 实验方法 509.3 实验结果 51第 10 章 维生素 K1 的测定 5410.1 仪器设备与试剂 5410.2 实验方法 55第 11 章 叶酸的测定 5611.1 仪器设备与试剂 5611.2 实验方法 56第 12 章 维生素 B12 的测定 5712.1 仪器设备与试剂 5712.2 实验方法 57附录 1 维生素标准溶液校正方法 59第 1 章 前言维生素（英语：Vitamin）是一系列有机化合物的统称。它们是生物体所需要的微量营养成分，而一般又无法由生物体自己生产，需要通过饮食等手段获得。维生素不能像糖类、蛋白质及脂肪那样可以产生能量、组成细胞，但是它们对生物体的新陈代谢起调节作用。维生素是食品中重要的营养成分，缺乏维生素会导致严重的健康问题，适量摄取维生素可以保持身体健康，过量摄取维生素却会导致中毒；因此食品中维生素含量的检测至关重要。国家颁布多项标准法规，对食品、保健品、食品添加剂等中维生素含量检测进行规范，以保障食品安全。依利特仪器参考国家标准及文献，整理了食品中维生素检测解决方案，供相关企业参考使用。1.1 HPLC 法测定维生素含量的标准第 2 章 维生素 A 的含量测定2.1 反相高效液相色谱法本节反相高效液相色谱法对维生素 A 进行检测是参考 GB 5009.82-2016《食品安全国家标准 食品中维生素 A、D、E 的测定》，适用于需要参照 GB 5009.82-2016 对食品中维生素 A 进行检测的用户参考使用。2.1.1 仪器设备与试剂实验过程中其它玻璃器皿还包括棕色容量瓶 (10mL、50mL)、1.5mL 塑料离心管、移液枪 (0~1000µL，0~5000µL)、移液枪枪头 (1mL，5mL)、一次性注射器 (1mL)、针筒式滤膜 (0.45µm)、进样针、一次性 PVC 手套、一次性口罩等。2.1.2 实验方法标准溶液配制维生素 A 标准储备溶液 (0.500mg/mL)：准确称取 25.0mg 维生素 A 标准品，用无水乙醇溶解后，转移入 50mL 容量瓶中，定容至刻度，此溶液浓度约为 0.500mg/

二维系统测定维生素D方案

作者：admin2025-09-24

前言维生素 D（简称 VD）是一种脂溶性维生素，最主要的成分是维生素 D3与 D2。前者由人皮下的 7-脱氢胆固醇经紫外线照射而成；后者由植物或酵母中含有的麦角固醇经紫外线照射而成。维生素 D 的主要功用是促进小肠粘膜细胞对钙和磷的吸收，肠中钙离子吸收需要一种钙结合蛋白，1，25-二羟基维生素 D3可诱导此蛋白合成，促进 Ca2+吸收，又可促进钙盐的更新及新骨生成，也促进磷吸收与肾小管细胞对钙、磷的重吸收，故可提高血钙、血磷浓度，有利于新骨生成和钙化。维生素 D 还有促进皮肤细胞生长、分化及调节免疫功能作用。一般成年人经常接触日光不致发生缺乏病，婴幼儿、孕妇、乳母及不常到户外活动的老人要增加维生素 D 供给量到每日 10μg（相当于 400 国际单位）。缺乏维生素 D 儿童可患佝偻病，成人患骨质软化症。二维液相色谱二维液相色谱是将分离机理不同而又相互独立的两支色谱柱组合，加强分离能力的联用技术。二维液相色谱系统通常由第一维分离柱和第二维分离柱串联而成，两柱之间以阀切换作为接口，通过流动相流路的改变，将部分或全部第一维柱流出的组分，导入第二维进行二次分离，从而起到净化目标化合物，提高系统分离能力的作用。在一维分离系统中不能完全分离的组分，可能在二维系统中得到更好的分离，分离能力、分辨率可得到极大的提高。二维液相色谱可应用于制药、生物制药、天然产物的研究和食品分析等领域中复杂样品的分离分析，有着广阔的应用前景。本次依利特公司根据《GB 5009.296-2023 食品安全国家标准 食品中维生素 D 的测定》，用在线柱切换-反相液相色谱法（二维液相色谱法），提出了测定维生素 D 的解决方案，供大家参考使用。2、实验方法2.1 样品溶液配制维生素D_2标准储备溶液 1mg/mL：准确称取 50mg 维生素D_2标准品于烧杯中，用甲醇溶解并转移至 50mL 容量瓶中，定容至刻度，混匀。维生素D_3标准储备溶液 1mg/mL：准确称取 50mg 维生素D_3标准品于烧杯中，用甲醇溶解并转移至 50mL 容量瓶中，定容至刻度，混匀。维生素D_2、D_3混合标准溶液 50μg/mL：分别吸取维生素D_2标准储备溶液 1mg/mL、维生素D_3标准储备溶液 1mg/mL 各 5.00mL 于 100mL 棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，混匀。2.2 色谱条件色谱柱：一维色谱柱：Supersil C8 3μm，120Å，ID4.6×150mm二维色谱柱：SinoPak C18 3μm，120Å，ID4.6×150mm富集柱：Supersil ODS2 5μm，300Å，ID4.6×10mm检测波长：264nm柱温：室温一维系统流量：1.0 mL/min进样体积：100μL流动相组成 (V/V)：A: 水；B: 乙腈 / 甲醇 = 3/1梯度表：二维系统流量：1.0 mL/min流动相组成 (V/V)：乙腈 / 水